2×HiF Taq प्लस मास्टर मिक्स
बिरालो नम्बर: HCR2014B
HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स (डाई संग) एक प्रयोग गर्न को लागी तयार 2×प्रिमिक्स समाधान प्लस HIF DNA पोलिमरेज, dNTPs, र अनुकूलित बफर समावेश छ।कोठाको तापमानमा दुई मोनोक्लोनल एन्टिबडीहरू जसले पोलिमरेज गतिविधिलाई रोक्छ र 3′→5′exonuclease गतिविधि सजिलै र अत्यधिक विशिष्ट हट स्टार्ट PCR को लागि मास्टर मिक्समा थपिन्छ।इन्जाइमलाई लामो टुक्रा प्रवर्द्धन क्षमता दिनको लागि मास्टर मिक्समा एक्स्टेन्सन कारक थपिएको छ, प्रवर्धनको लम्बाइ 13 kb सम्म हुन सक्छ, इन्जाइममा 5′→3′ DNA पोलिमरेज गतिविधि र 3′→5′ हुन्छ। exonuclease गतिविधि, यसको निष्ठा Taq DNA पोलिमरेजको 83 गुणा हो, जुन साधारण DNA पोलिमरेजको 9 गुणा हो।यो जटिल टेम्प्लेटहरूको प्रवर्धनको लागि उपयुक्त छ, प्रवर्धन उत्पादन एक कुंद अन्त हो।
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स (डाई संग) मा छिटो र सजिलो, उच्च संवेदनशीलता, बलियो विशिष्टता, राम्रो स्थिरता, इत्यादिका फाइदाहरू छन्, प्रतिक्रिया प्रणालीले प्राइमर र टेम्प्लेटहरू मात्र थप्न आवश्यक छ, र दुई-द्वारा विस्तार गर्न सकिन्छ। चरण प्रोटोकल, प्रयोगात्मक चरणहरू सरल र समय बचत।यो उत्पादनले इलेक्ट्रोफोरेसिस सूचक रंगहरू समावेश गर्दछ, र PCR उत्पादनहरू इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि सीधा प्रयोग गर्न सकिन्छ।थप रूपमा, उत्पादनले एक विशिष्ट सुरक्षात्मक एजेन्ट पनि समावेश गर्दछ, जसले गर्दा मास्टर मिक्सले दोहोर्याइएको फ्रिज-थव पछि स्थिर गतिविधि कायम राख्न सक्छ।
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादनहरू 1 वर्षको लागि -25~-15℃ मा भण्डारण गर्नुपर्छ।
निर्दिष्टीकरणहरू
उत्पादन विशिष्टता | मास्टर मिक्स |
एकाग्रता | २× |
हट स्टार्ट | बिल्ट-इन हट स्टार्ट |
ओभरह्याङ | ब्लन्ट |
प्रतिक्रिया गति | द्रुत |
आकार (अन्तिम उत्पादन) | 13kb सम्म |
यातायातका लागि सर्तहरू | सुख्खा बर्फ |
उत्पादन प्रकार | उच्च फिडेलिटी PCR प्रिमिक्सहरू |
निर्देशनहरू
१.PCR प्रतिक्रिया प्रणाली
अवयवहरू | भोल्युम (μL) |
डीएनए टेम्प्लेट | उपयुक्त |
फर्वार्ड प्राइमर (१० μmol/L) | २.५ |
उल्टो प्राइमर (१० μmol/L) | २.५ |
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स | 25 |
ddH2O | 50 सम्म |
२.विभिन्न टेम्प्लेटहरूको सिफारिस गरिएको प्रयोग
टेम्प्लेटको प्रकार | टुक्राहरूलाई 1kb देखि 10 kb सम्म विस्तार गर्नुहोस् |
जीनोमिक डीएनए | 50ng-200 ng |
प्लाज्मिड वा भाइरल डीएनए | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 μL (अन्तिम PCR प्रतिक्रिया मात्राको 10% भन्दा बढी नहोस्) |
३.प्रवर्धन प्रोटोकल
1) दुई-चरण प्रोटोकल (जटिलता टेम्प्लेट)
साइकल चरण | अस्थायी। | समय | साइकलहरू |
प्रारम्भिक विकृतीकरण | 98 ℃ | ३ मिनेट | 1 |
विकृतीकरण | 98 ℃ | १० सेकेन्ड | ३०-३५ |
विस्तार | 68 ℃ | ३० सेकेन्ड/केबी | |
अन्तिम विस्तार | ७२ ℃ | ५ मिनेट | 1 |
२) तीन-चरण प्रोटोकल (नियमित प्रोटोकल)
साइकल चरण | अस्थायी। | समय | साइकलहरू |
प्रारम्भिक विकृतीकरण | 98 ℃ | ३ मिनेट | 1 |
विकृतीकरण | 98 ℃ | १० सेकेन्ड | ३०-३५ |
एनिलिङ | ६० ℃ | २० सेकेन्ड | |
विस्तार | ७२ ℃ | ३० सेकेन्ड/केबी | |
अन्तिम विस्तार | ७२ ℃ | ५ मिनेट | 1 |
3) एनिलिङ ग्रेडियन्ट प्रोटोकल (जटिलता टेम्प्लेट)
साइकल चरण | तापक्रम | समय | साइकलहरू |
प्रारम्भिक विकृतीकरण | 98 ℃ | ३ मिनेट | 1 |
विकृतीकरण | 98 ℃ | १० सेकेन्ड | १५ (1℃ प्रति चक्र कटौती) |
ग्रेडियन्ट एनिलिङ | 70-55 ℃ | २० सेकेन्ड | |
विस्तार | ७२ ℃ | ३० सेकेन्ड/केबी | |
विकृतीकरण | 98 ℃ | १० सेकेन्ड |
20 |
एनिलिङ | ५५ ℃ | २० सेकेन्ड | |
विस्तार | ७२ ℃ | ३० सेकेन्ड/केबी | |
अन्तिम विस्तार | ७२ ℃ | ५ मिनेट | 1 |
विभिन्न प्रवर्धन प्रोटोकल अन्तर्गत सुविधाहरू
प्रोटोकोl | दुई-चरण | तीन-चरण | ग्रेडियन्ट एनिलिङ |
विनिर्देश। | छिटो | मध्यम | ढिलो |
विशिष्टता | उच्च | मध्यम | उच्च |
PCR उपज | मध्यम | उच्च | मध्यम |
पत्ता लगाउने दर | उच्च | मध्यम | उच्च |
नोटहरू
कृपया आफ्नो स्वास्थ्य र सुरक्षा सुनिश्चित गर्न आवश्यक PPE, जस्तै प्रयोगशाला कोट र पन्जा लगाउनुहोस्!