नमूना रिलीज अभिकर्मक
नमूना रिलीज अभिकर्मक आणविक POCT निदान परिदृश्यहरूको लागि हो।प्रत्यक्ष प्रवर्द्धन LAMP र प्रत्यक्ष प्रवर्द्धन PCR को दुई प्रणालीहरूको लागि, त्यहाँ न्यूक्लिक एसिड निकासी को आवश्यकता छैन।नमूनाको कच्चा lysate प्रत्यक्ष प्रवर्द्धन गर्न सकिन्छ, लक्ष्य जीन सही रूपमा पत्ता लगाउन सकिन्छ, नमूना पत्ता लगाउने समय थप छोटो गर्न सकिन्छ, जुन पूर्ण रूपमा आणविक POCT को आवेदन आवश्यकताहरूसँग मेल खान्छ।यो नाक स्वाब, घाँटी स्वाब र अन्य नमूना प्रकार को लागी उपयुक्त छ।प्रशोधित नमूनाहरू वास्तविक-समय फ्लोरोसेन्स मात्रात्मक PCR वा LAMP पत्ता लगाउनको लागि प्रत्यक्ष रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ, र परम्परागत निकासी विधिहरू जस्तै जटिल न्यूक्लिक एसिड निकासी कार्यहरू बिना नै प्राप्त गर्न सकिन्छ।
भण्डारण सर्तहरू
कोठाको तापमानमा ढुवानी र भण्डार गर्नुहोस्।
गुणस्तर नियन्त्रण
कार्यात्मक पत्ता लगाउने - मात्रात्मक qPCR: 800μl नमूना रिलीज अभिकर्मक प्रणाली विस्तार गरिएको थियो
1000 प्रतिहरू उपन्यास स्यूडोभाइरसको साथ, एक नाक स्वाब नमूना, समान प्रवर्द्धन वक्र परिणाम र± ०.५ Ct भित्र ΔCt मानहरू।
प्रयोगात्मक प्रक्रियाres
1. 800 μl नमूना रिलीज अभिकर्मक लिनुहोस् र 1.5 एमएल नमूना ट्यूबमा lysis समाधान फैलाउनुहोस्।
2. स्वाबको साथ नाक स्वाब वा घाँटी स्वाब लिनुहोस्; नाक स्वाब नमूना प्रक्रिया: बाँझ स्वाब लिनुहोस् र यसलाई नाकमा हाल्नुहोस्, बिस्तारै लगभग 1.5 सेन्टिमिटर गहिरोमा अगाडि बढ्नुहोस्, 15 सेकेन्ड भन्दा बढीको लागि नाक म्यूकोसा विरुद्ध 4 पटक बिस्तारै घुमाउनुहोस्। , त्यसपछि एउटै स्वाबको साथ अन्य नाक गुहामा उही अपरेशन दोहोर्याउनुहोस्। घाँटी स्वाब नमूना प्रक्रिया: बाँझ स्वाब लिनुहोस् र बिस्तारै, ग्रसनी टन्सिल र पछाडिको ग्रसनी भित्ता 3 पटक छिटो पुछ्नुहोस्।
३.स्वाब तुरुन्तै नमूना ट्यूबमा राख्नुहोस्।स्वाबको टाउको घुमाउनुपर्छ र कम्तिमा ३० सेकेन्डसम्म भण्डारण समाधानमा मिसाउनु पर्छ कि नमूना नमूना ट्यूबमा पूर्ण रूपमा बाहिरिएको छ।
4. कोठाको तापक्रम (20 ~ 25 ℃) मा 1 मिनेटको लागि इन्क्युबेशन, लिसिस बफरको तयारी पूरा भयो।
5. दुवै 25μl प्रणाली RT-PCR र RT-LAMP पत्ता लगाउन प्रयोगहरूको लागि टेम्प्लेट थपको 10μl मात्रासँग उपयुक्त थिए।
नोटहरू
1. एकल स्वाब संग सम्बन्धित नमूना प्रत्यक्ष lysate को न्यूनतम मात्रा 400μl मा समायोजित गर्न सकिन्छ, जुन परीक्षण आवश्यकता अनुसार समायोजित गर्न सकिन्छ।
2. नमूना रिलिज अभिकर्मक द्वारा नमूना प्रक्रिया गरेपछि, यसलाई जतिसक्दो चाँडो परीक्षणको अर्को चरण सञ्चालन गर्न सिफारिस गरिन्छ, अन्तराल प्रतीक्षा समय 1 घण्टा भन्दा कम हुन्छ।
3. नमूना lysate को pH एसिडिक छ, र पत्ता लगाउने प्रणाली एक निश्चित बफर हुनु पर्छ।यो धेरैजसो PCR, RT-PCR, र LAMP प्रतिदीप्ति पत्ता लगाउन pH बफरको साथ उपयुक्त छ, तर बफर बिना LAMP colorimetric पत्ता लगाउन उपयुक्त छैन।
