prou
उत्पादनहरू
प्रोटिनेज K (Lyophilized पाउडर) HC4500A विशेष छवि
  • प्रोटिनेज K (Lyophilized पाउडर) HC4500A
  • प्रोटिनेज K (Lyophilized पाउडर) HC4500A

प्रोटीनेज के (लियोफिलाइज्ड पाउडर)


बिरालो नम्बर: HC4500A

प्याकेज: 100mg/1g/10g/100g/500g

DNase, RNase, Nickase बाट मुक्त

गतिविधि: ≥30 U/mg

शेल्फ जीवन 3 वर्ष

कोठाको तापमानमा ढुवानी

एक ब्याच क्षमता 30kg

 

  • sns01
  • sns03
  • sns04
  • sns05

उत्पादन विवरण

उत्पादन विवरण

डाटा

बिरालो नम्बर: HC4500A

Proteinase K व्यापक सब्सट्रेट विशिष्टताको साथ एक स्थिर सेरीन प्रोटीज हो।यसले डिटर्जेन्टको उपस्थितिमा पनि नेटिभ स्टेटमा धेरै प्रोटीनहरू घटाउँछ।क्रिस्टल र आणविक संरचना अध्ययनबाट प्रमाणले संकेत गर्दछ कि इन्जाइम सक्रिय साइट उत्प्रेरक ट्रायड (एएसपी) को साथ सबटिलिसिन परिवारसँग सम्बन्धित छ।39- उनको69- सर२२४)।क्लीभेजको प्रमुख साइट एलीफेटिक र एरोमेटिक एमिनो एसिडको कार्बोक्साइल समूहसँग जोडिएको पेप्टाइड बन्ड हो जसमा अवरुद्ध अल्फा एमिनो समूहहरू छन्।यो सामान्यतया यसको व्यापक लागि प्रयोग गरिन्छविशिष्टता।

 

  • अघिल्लो:
  • अर्को:

    • भण्डारण सर्तहरू

    2-8 ℃ छोटो अवधि भण्डारण, -25 ~ -15 ℃ दीर्घकालीन भण्डारण।सुख्खा पाउडर स्थिति -25~-15℃ 3 वर्षको लागि मान्य;इन्जाइम पाउडर उपयुक्त मात्रा मा भंग गर्नुपर्छ।

     

    निर्दिष्टीकरण

    उपस्थिति

    सेतो देखि अफ-सेतो अमोर्फस lyophilized पाउडर

    गतिविधि

    ≥30 U/mg

    DNase

    कुनै पनि पत्ता लागेन

    RNase

    कुनै पनि पत्ता लागेन

      

    गुणहरू

    EC नम्बर

    ३.४.२१.६४ (ट्रिटिराचियम एल्बमबाट पुनः संयोजक)

    आणविक वजन

    २९ kDa (SDS-PAGE)

    आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु

    ७.८१

    इष्टतम pH

    ७.०-१२.० चित्र १

    इष्टतम तापमान

    ६५ ℃ चित्र २

    pH स्थिरता

    pH 4.5-12.5 (25℃, 16h) चित्र।3

    थर्मल स्थिरता

    50℃ (pH 8.0, 30min) तल चित्र।4

    सक्रियकर्ताहरू

    एसडीएस, यूरिया

    अवरोधकहरू

    डाइसोप्रोपाइल फ्लोरोफोस्फेट;phenylmethylsulfonyl फ्लोराइड

     

    अनुप्रयोगहरू

    1. जेनेटिक डायग्नोस्टिक किट

    2. RNA र DNA निकासी किटहरू

    3. तन्तुहरूबाट गैर-प्रोटीन घटकहरू निकासी, प्रोटिन अशुद्धताको ह्रास, जस्तै DNA खोपहरू र हेपरिनको तयारी

    4. स्पंदित इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा क्रोमोजोम DNA को तयारी

    5. पश्चिमी धब्बा

    6. इन्जाइमेटिक ग्लाइकोसिलेटेड एल्बुमिन अभिकर्मक इन भिट्रो डायग्नोसिस

      

    सावधानी

    प्रयोग गर्दा वा तौल गर्दा सुरक्षात्मक पन्जा र चश्मा लगाउनुहोस्, र प्रयोग पछि राम्रो हावामा राख्नुहोस्।यो उत्पादन छाला एलर्जी प्रतिक्रिया र गम्भीर आँखा जलन हुन सक्छ।यदि सास लिने हो भने, यसले एलर्जी वा दमको लक्षण वा डिस्पनिया हुन सक्छ।श्वासप्रश्वासमा समस्या आउन सक्छ।

     

    परख

    एकाइ परिभाषा

    एक इकाई (U) लाई निम्न सर्तहरूमा 1 μmol tyrosine प्रति मिनेट उत्पादन गर्न केसिनलाई हाइड्रोलाइज गर्न आवश्यक इन्जाइमको मात्राको रूपमा परिभाषित गरिएको छ।

     

    अभिकर्मक तयारी

    अभिकर्मक I: 1g दूध केसिन 0.1M सोडियम फस्फेट घोल (pH 8.0) को 50ml मा भंग गरियो, 65-70 ℃ पानीमा 15 मिनेटको लागि इन्क्युबेटेड, हलचल र घुलनशील, पानी द्वारा चिसो, सोडियम हाइड्रोक्साइड द्वारा pH 8.0 मा समायोजित, र फिक्स भोल्युम। 100ml

    अभिकर्मक II: 0.1M ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड, 0.2M सोडियम एसीटेट, 0.3M एसिटिक एसिड।

    अभिकर्मक III: 0.4M Na2CO3समाधान।

    अभिकर्मक IV: फोरिन्ट अभिकर्मक 5 पटक शुद्ध पानी संग पातलो।

    अभिकर्मक V: इन्जाइम पातलो: 0.1M सोडियम फास्फेट समाधान (pH 8.0)।

    अभिकर्मक VI: tyrosine समाधान: 0, 0.005, 0.025, 0.05, 0.075, 0.1, 0.25 umol/ml tyrosine 0.2M HCL सँग विघटित।

     

    प्रक्रिया

    1. 0.5ml अभिकर्मक I लाई पहिले नै 37 ℃ मा न्यानो पारिएको छ, 0.5ml इन्जाइम घोल थप्नुहोस्, राम्ररी मिलाउनुहोस्, र 10 मिनेटको लागि 37 ℃ मा इन्क्यूबेट गर्नुहोस्।

    2. प्रतिक्रिया रोक्न 1 मिलीलीटर अभिकर्मक II थप्नुहोस्, राम्रोसँग मिलाउनुहोस्, र 30 मिनेटको लागि इन्क्युबेशन जारी राख्नुहोस्।

    3. Centrifugate प्रतिक्रिया समाधान।

    ४. ०.५ एमएल सुपरनेटेन्ट लिनुहोस्, २.५ एमएल अभिकर्मक III, ०.५ एमएल अभिकर्मक IV थप्नुहोस्, राम्ररी मिलाउनुहोस् र ३७ डिग्री सेल्सियसमा ३० मिनेटको लागि इन्क्युबेट गर्नुहोस्।

    5. OD६६०OD को रूपमा निर्धारण गरिएको थियो1;खाली नियन्त्रण समूह: 0.5ml अभिकर्मक V OD निर्धारण गर्न इन्जाइम समाधान प्रतिस्थापन गर्न प्रयोग गरिन्छ६६०OD को रूपमा2, ΔOD=OD1-ओडी2.

    6. L-tyrosine मानक वक्र: 0.5mL फरक एकाग्रता L tyrosine समाधान, 2.5mL अभिकर्मक III, 0.5mL अभिकर्मक IV 5mL सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमा, 37 ℃ मा 30 मिनेटको लागि इन्क्युबेट गर्नुहोस्, OD को लागि पत्ता लगाउनुहोस्६६०L-tyrosine को विभिन्न एकाग्रताको लागि, त्यसपछि मानक वक्र Y=kX+b प्राप्त गरियो, जहाँ Y L-tyrosine एकाग्रता हो, X OD हो।६००.

     

     

    गणना

    २: प्रतिक्रिया समाधानको कुल मात्रा (mL)

    ०.५: इन्जाइम समाधानको मात्रा (एमएल)

    0.5: क्रोमोजेनिक निर्धारण (mL) मा प्रयोग हुने प्रतिक्रिया तरल मात्रा

    10: प्रतिक्रिया समय (मिनेट)

    Df: मल्टिपल डिल्युसन

    C: इन्जाइम एकाग्रता (mg/mL)

     

    सन्दर्भहरू

    1. Wieger U & Hilz H. FEBS Lett।(१९७२); २३:७७।

    2. Wieger U & Hilz H. बायोकेम।बायोफिज।Res.कम्युन।(१९७१); ४४:५१३।

    3. हिल्ज, एच।et al.,युरो।जे बायोकेम।(१९७५); ५६:१०३–१०८।

    4. सम्ब्रुक जेet al., आणविक क्लोनिंग: एक प्रयोगशाला म्यानुअल, दोस्रो संस्करण, कोल्ड स्प्रिंग हार्बर प्रयोगशाला प्रेस, कोल्ड स्प्रिंग हार्बर (1989)।

     

     

     

     

     

     

     

    तथ्याङ्कहरू
    फिग. १इष्टतम pH
    100mm बफर समाधान: pH6.0-8.0, Na-phosphate;pH8.0-9.0, Tris-HCL;pH9.0-12.5, Glycine-NaOH. इन्जाइम एकाग्रता: 1mg/mL

     

     

     

    चित्र २ इष्टतम तापक्रम

    20 मिमी K-फस्फेट बफर pH 8.0 मा प्रतिक्रिया।इन्जाइम एकाग्रता: 1 मिलीग्राम / एमएल

     

     

    चित्र 3 pH स्थिरता

    25℃, 50mM बफर समाधान संग 16 h-उपचार: pH 4.5-5.5, एसीटेट;pH 6.0-8.0, Na-phosphate;pH 8.0-9.0, Tris-HCL।pH 9.0-12.5, Glycine-NaOH।इन्जाइम एकाग्रता: 1 मिलीग्राम / एमएल

     

     

    चित्र 4 थर्मल स्थिरता

    50mm Tris-HCL बफर, pH 8.0 सँग 30 मिनेट-उपचार।इन्जाइम एकाग्रता: 1 मिलीग्राम / एमएल

     

    चित्र 5 भण्डारण स्थिरताty at २५ ℃

    सम्बन्धित उत्पादनहरु

    यहाँ आफ्नो सन्देश लेख्नुहोस् र हामीलाई पठाउनुहोस्
    खोज्न इन्टर थिच्नुहोस् वा बन्द गर्न ESC थिच्नुहोस्