२×पीसीआर मास्टर मिक्स (डाई बिना)
PCR मास्टर मिक्स एक प्रकारको परम्परागत PCR प्रिमिक्स समाधान हो जुन Taq DNA Polymerase, dNTP मिक्स MgCl2 र अनुकूलित बफर सहित प्रयोग गर्न तयार छ।प्रतिक्रियाको समयमा, प्रवर्धनको लागि केवल प्राइमर र टेम्प्लेट थप्न सकिन्छ, जसले प्रयोगको सञ्चालन चरणहरूलाई धेरै सरल बनाउँछ।यस उत्पादनमा उत्कृष्ट स्टेबिलाइजरहरू छन् र 4 ℃ मा 3 महिनाको लागि भण्डारण गर्न सकिन्छ।PCR उत्पादनमा 3′-dA प्रोट्रुजन हुन्छ र सजिलै T भेक्टरमा क्लोन गर्न सकिन्छ।
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादन दुई वर्षको लागि -25 ℃ ~ -15 ℃ मा भण्डारण गर्नुपर्छ।
निर्दिष्टीकरणहरू
| निष्ठा ( बनाम Taq ) | १× |
| हट स्टार्ट | No |
| ओभरह्याङ | ३′-ए |
| पोलिमरेज | Taq DNA पोलिमरेज |
| प्रतिक्रिया ढाँचा | सुपरमिक्स वा मास्टर मिक्स |
| प्रतिक्रिया गति | मानक |
| उत्पादन प्रकार | पीसीआर मास्टर मिक्स (२×) |
निर्देशनहरू
१.प्रतिक्रिया प्रणाली
| अवयवहरू | आकार (μL) |
| टेम्प्लेट डीएनए | उपयुक्त |
| प्राइमर १ (१० μmol/L) | 2 |
| प्राइमर २ (१० μmol/L) | 2 |
| पीसीआर मास्टर मिक्स | 25 |
| ddH2O | ५० सम्म |
2।प्रवर्धन प्रोटोकल
| साइकल चरणहरू | तापक्रम (°C) | समय | साइकलहरू |
| प्रि-डिनेचरेशन | 94 ℃ | ५ मिनेट | 1 |
| विकृतीकरण | 94 ℃ | ३० सेकेन्ड | 35 |
| एनिलिङ | 50-60 ℃ | ३० सेकेन्ड | |
| विस्तार | 72 ℃ | ३०-६० सेकेन्ड/केबी | |
| अन्तिम विस्तार | 72 ℃ | १० मिनेट | 1 |
नोट:
1) टेम्प्लेट प्रयोग: 50-200 एनजी जीनोमिक डीएनए;०.१-१० एनजी प्लाज्मिड डीएनए।
२) एमजी2+एकाग्रता: यो उत्पादनले धेरै PCR प्रतिक्रियाहरूको लागि उपयुक्त MgCl2 को 3 mM समावेश गर्दछ।
3) एनीलिंग तापमान: कृपया प्राइमरहरूको सैद्धान्तिक Tm मानलाई सन्दर्भ गर्नुहोस्।प्राइमरको सैद्धान्तिक मूल्य भन्दा कम 2-5 ℃ मा annealing तापमान सेट गर्न सकिन्छ।
4) विस्तार समय: आणविक पहिचान को लागी, 30 सेकेन्ड / kb सिफारिस गरिएको छ।जीन क्लोनिङको लागि, 60sec/kb सिफारिस गर्नुभयो।
नोटहरू
१.तपाईंको सुरक्षा र स्वास्थ्यको लागि, कृपया प्रयोगशाला कोट र सञ्चालनको लागि डिस्पोजेबल पन्जा लगाउनुहोस्।
२.अनुसन्धानको लागि मात्र प्रयोग!
