अल्ट्रा न्यूक्लिज GMP-ग्रेड
बिरालो नम्बर: HC2016A
UltraNuclease GMP-ग्रेडलाई Escherichia coli (E.coli) मा आनुवंशिक रूपमा ईन्जिनियर गरिएको र GMP वातावरण अन्तर्गत तयार गरी अभिव्यक्त र शुद्ध गरिन्छ।यसले वैज्ञानिक अनुसन्धानमा सेल सुपरनेटान्ट र सेल लाइसेटको चिपचिपापन कम गर्न सक्छ, प्रोटीन शुद्धिकरण दक्षता बढाउन र प्रोटीन कार्यात्मक अनुसन्धान बढाउन सक्छ।उत्पादनले होस्ट न्यूक्लिक एसिड अवशेषहरूलाई pg-ग्रेडमा घटाउन सक्छ, भाइरस शुद्धिकरण, भ्याक्सिन निर्माण, र प्रोटीन/पोलिसेकराइड औषधि निर्माण लगायतका अनुप्रयोगहरूको जैविक उत्पादनहरूको प्रदर्शन र सुरक्षामा सुधार गर्दछ।यसबाहेक, उत्पादनलाई सेल थेरापी र भ्याक्सिन विकासमा मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाहरू (PBMC) को क्लम्पिंग रोक्न पनि लागू गर्न सकिन्छ।
UltraNuclease एक बफर (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ग्लिसरीन) मा रङ्गहीन, पारदर्शी तरलको उपस्थितिको साथ, एक स्टेरिलाइज्ड अभिकर्मकको रूपमा प्रदान गरिएको छ।यो उत्पादन GMP प्रक्रिया आवश्यकताहरु द्वारा उत्पादित र तरल रूप मा प्रदान गरिएको छ।
अवयवहरू
UltraNuclease GMP-ग्रेड (250 U/μL)
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादन सुक्खा बरफ संग पठाइन्छ र दुई वर्ष को लागि -25 ℃ ~ -15 ° C मा भण्डारण गर्न सकिन्छ।
यदि उत्पादन खोलिएको छ र एक हप्ता भन्दा बढीको लागि 4℃ मा भण्डारण गरिएको छ भने, हामी फिल्टर गर्न सिफारिस गर्छौंमाइक्रोबियल प्रदूषण रोक्नको लागि उत्पादन।
निर्दिष्टीकरणहरू
| अभिव्यक्ति होस्ट | UltraNuclease जीन के साथ पुन: संयोजक ई. कोलाई |
| आणविक वजन | २६.५ kDa |
| सोइलेक्ट्रिक बिन्दु | ६.८५ |
| शुद्धता | ≥99% (SDS-PAGE) |
| भण्डारण बफर | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ग्लिसरीन |
|
एकाइ परिभाषा | एक गतिविधि एकाइ (U) को परिभाषा प्रयोग गरिएको इन्जाइम को मात्रा होΔA260 को अवशोषण मान 1.0 ले 30 मिनेटमा 2. 625 एमएलमा परिवर्तन गर्नुहोस्8.0 को pH संग 37℃ मा प्रतिक्रिया प्रणाली (को पूर्ण पाचन बराबर37 μg सामन शुक्राणु डीएनए ओलिगोन्यूक्लियोटाइडमा)। |
निर्देशनहरू
1. नमूना सङ्कलन
अनुयायी कोशिकाहरू: माध्यम हटाउनुहोस्, कोशिकाहरूलाई PBS बाट धुनुहोस्, र supernatant हटाउनुहोस्।
निलम्बन कक्षहरू: सेन्ट्रीफ्यूगेशनद्वारा कोशिकाहरू सङ्कलन गर्नुहोस्, कोशिकाहरूलाई PBS मार्फत धुनुहोस्, 6,000 मा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्।10 मिनेटको लागि rpm, गोली सङ्कलन।
Escherichia coli: सेन्ट्रीफ्यूगेशनद्वारा ब्याक्टेरिया सङ्कलन गर्नुहोस्, PBS बाट एक पटक धुनुहोस्, 8,000 मा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्5 मिनेटको लागि rpm, र गोली सङ्कलन।
2. नमूना उपचार
सङ्कलन गरिएको सेल पेलेटलाई मास(g) र भोल्युम (mL) 1:(10-20) को अनुपातमा लिसिस बफरद्वारा वा बरफमा वा कोठाको तापक्रममा मेकानिकल वा रासायनिक विधिहरूद्वारा उपचार गर्नुहोस् (कोषको गोलीको 1 ग्राममा लगभग
109 कक्षहरू)।
3. इन्जाइम उपचार
प्रतिक्रिया प्रणालीमा 1-5mM MgCl थप्नुहोस् र pH लाई 8-9 मा समायोजन गर्नुहोस्।
1 ग्राम सेल पेलेटहरू पचाउन 250 इकाइहरूको अनुपात अनुसार अल्ट्रान्यूक्लिज थप्नुहोस्, 37 ℃ मा 30 मिनेट भन्दा बढि इन्क्युबेट गर्नुहोस्।चयन गर्नको लागि कृपया "सिफारिस गरिएको प्रतिक्रिया समय" फारमलाई सन्दर्भ गर्नुहोस्उपचार को अवधि।
4. सुपरनेटेन्ट सङ्कलन
12,000 rpm मा 30 मिनेटको लागि सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस् र supernatant सङ्कलन गर्नुहोस्।
नोट: यदि समाधान अम्लीय वा क्षारीय छ, वा नुन, डिटर्जेंट, वा उच्च सांद्रता समावेश गर्दछ।denaturants, कृपया इन्जाइमको खुराक बढाउनुहोस् वा तदनुसार उपचार समय विस्तार गर्नुहोस्।
सिफारिस गरिएको प्रतिक्रिया अवस्थाons
| प्यारामिटर | इष्टतम अवस्था | प्रभावकारी अवस्था |
| Mg²+ एकाग्रता | 1-5 मिमी | 1-10 मिमी |
| pH | ८-९ | ६-१० |
| तापक्रम | 37 ℃ | ०-४२ ℃ |
| DTT एकाग्रता | ०-१०० मिमी | > ० एमएम |
| Mercaptoethanol एकाग्रता | ०-१०० मिमी | > ० एमएम |
| Monovalent Cation एकाग्रता | ०-२० मिमी | ०-१५० मिमी |
| फास्फेट लामो एकाग्रता | ०-१० मिमी | ०-१०० मिमी |
सिफारिस गर्नुभयो प्रतिक्रिया समय (३७ डिग्री सेल्सियस, २ mM Mg²+, pH ८.०)
| UltraNuclease राशि (अन्तिम एकाग्रता) | प्रतिक्रिया समय |
| ०.२५ U/mL | >१० घन्टा |
| 2.5 U/mL | > 4 घन्टा |
| 25 U/mL | ३० मिनेट |
नोट:
कृपया आफ्नो स्वास्थ्य र सुरक्षा सुनिश्चित गर्न आवश्यक PPE, जस्तै प्रयोगशाला कोट र पन्जा लगाउनुहोस्!
