मल्टिप्लेक्स qPCR प्रोब प्रिमिक्स
बिरालो नम्बर: HCB5051A
TaqMan मल्टिप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (डाई आधारित) 2 × वास्तविक समय मात्रात्मक PCR एम्प्लीफिकेशनको लागि पूर्व-समाधान हो जुन उच्च संवेदनशीलता र विशिष्टता द्वारा विशेषता हो, जुन रंगमा नीलो छ, र नमूना थप्ने प्रभाव छ।यो उत्पादन 2× मिक्स पूर्व-मिश्रित अभिकर्मक हो जसले एकल प्रतिक्रियामा चारवटा फ्लोरोसेन्ट मात्रात्मक PCR प्रतिक्रियाहरूलाई सक्षम बनाउँछ।यो उत्पादनले हट-स्टार्ट Taq इन्जाइममा आनुवंशिक रूपमा परिमार्जित एन्टिबडी विधि समावेश गर्दछ, प्रवर्धन संवेदनशीलता र विशिष्टतामा धेरै सुधार गर्दछ।एकै समयमा, यस उत्पादनले बहु-प्रतिक्रिया बफरलाई गहिरो रूपमा अनुकूलित गरेको छ, जसले प्रतिक्रियाको प्रवर्धन दक्षता सुधार गर्न सक्छ र कम-सांद्रता टेम्प्लेटहरूको प्रभावकारी प्रवर्धनलाई बढावा दिन सक्छ।यो उत्पादन जीनोटाइपिङ र मल्टिप्लेक्स मात्रात्मक विश्लेषणको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ।
निर्दिष्टीकरण
| हट स्टार्ट | बिल्ट-इन तातो सुरुवात |
| पत्ता लगाउने विधि | प्राइमर-प्रोब पत्ता लगाउने |
| पीसीआर विधि | qPCR |
| पोलिमरेज | Taq DNA पोलिमरेज |
| नमूना को प्रकार | DNA |
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादन सुक्खा बरफ संग पठाइन्छ र 2 वर्ष को लागि -25~-15℃ मा भण्डारण गर्न सकिन्छ।
निर्देशनहरू
1. प्रतिक्रियाप्रणाली
| अवयवहरू | भोल्युम (μL) | अन्तिम एकाग्रता |
| 2× TaqMan मल्टिप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स | १२.५ | १× |
| प्राइमर मिक्स (१० μmol/L) a | × | ०.१ - ०.५ μmol/L |
| प्रोब मिक्स (१० μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox सन्दर्भ डाई | ०.५ | १× |
| टेम्प्लेट DNA/cDNA | १-१० | - |
| ddH2O | 25 सम्म | - |
नोट:अत्यधिक बुलबुले बलियो हल्लाबाट बच्नको लागि प्रयोग गर्नु अघि राम्ररी मिलाउनुहोस्।
aप्राइमर एकाग्रता: प्राइमर मिक्समा प्राइमरका धेरै जोडीहरू हुन्छन्, सामान्यतया प्रत्येक प्राइमरलाई ०.२ μmol/L को अन्तिम एकाग्रतामा र उपयुक्त भएमा ०.१ र ०.५ μmol/L बीच समायोजन गर्न सकिन्छ।
bप्रोब कन्सन्ट्रेशन: प्रोब मिक्समा विभिन्न फ्लोरोसेन्स सिग्नलहरू भएका धेरै प्रोबहरू हुन्छन्, र प्रत्येक प्रोबको एकाग्रतालाई विशिष्ट परिस्थिति अनुसार 50 र 250 nmol/L बीच समायोजन गर्न सकिन्छ।
१.रक्स डाई सन्दर्भ: यो रियल टाइम पीसीआर एम्प्लीफिकेशन उपकरणमा प्रयोग गरिन्छ जस्तै एप्लाइड बायोसिस्टमहरू कुवाहरू बीच उत्पन्न फ्लोरोसेन्स संकेतको त्रुटि सुधार गर्न;यो उत्पादनले Rox डाई सन्दर्भ समावेश गर्दैन।Cas#10200 सिफारिस गरिएको छ यदि आवश्यक छ।
२.टेम्प्लेट पातलो: qPCR अत्यधिक संवेदनशील छ, र यसलाई प्रयोगको लागि टेम्प्लेट पतला गर्न सिफारिस गरिन्छ।यदि टेम्प्लेट cDNA स्टक समाधान हो भने, टेम्प्लेट भोल्युम कुल भोल्युमको 1/10 भन्दा बढी हुनु हुँदैन।
३.प्रतिक्रिया प्रणाली: 25μL, 30μL वा 50 μL लक्षित जीन प्रवर्धनको प्रभावकारिता र दोहोरिने योग्यता सुनिश्चित गर्न सिफारिस गरिन्छ।
४।प्रणाली तयारी: कृपया सुपर क्लिन बेन्चमा तयारी गर्नुहोस्, र न्यूक्लिज अवशेष बिना टिप्स र प्रतिक्रिया ट्यूबहरू प्रयोग गर्नुहोस्;यो फिल्टर कारतूस संग सुझावहरू प्रयोग गर्न सिफारिस गरिएको छ।क्रस प्रदूषण र एरोसोल प्रदूषणबाट बच्नुहोस्।
२.प्रतिक्रिया कार्यक्रम
| साइकल चरण | अस्थायी. | समय | साइकलहरू |
| प्रारम्भिक-विच्छेदन | 95 ℃ | ५ मिनेट | 1 |
| विकृतीकरण | 95 ℃ | १५ सेकेन्ड | 45 |
| एनिलिङ/विस्तार | ६० ℃ | ३० सेकेन्ड |
नोट:
1।एनिलिङ/एक्सटेन्सन: डिजाइन गरिएको प्राइमर Tm मान अनुसार तापक्रम र समय उचित रूपमा समायोजन गर्न सकिन्छ।
२.प्रतिदीप्ति संकेत प्राप्ति: विभिन्न qPCR पत्ता लगाउने उपकरणहरूको लागि आवश्यक फ्लोरोसेन्स संकेत प्राप्ति समय फरक छ, कृपया न्यूनतम समय सीमा अनुसार सेट गर्नुहोस्।धेरै सामान्य उपकरणहरूको समय निम्नानुसार सेट गरिएको छ:
20 सेकेन्ड: एप्लाइड बायोसिस्टम 7700, 7900HT, 7500 फास्ट
31 सेकेन्ड: एप्लाइड बायोसिस्टम 7300
32 सेकेन्ड: एप्लाइड बायोसिस्टम 7500
नोटहरू
कृपया आफ्नो स्वास्थ्य र सुरक्षा सुनिश्चित गर्न आवश्यक PPE, जस्तै प्रयोगशाला कोट र पन्जा लगाउनुहोस्!
