2×PCR सुपर मिक्स (डाई संग)
2× PCR मास्टर मिक्समा Taq DNA Polymerase, dNTPs, र PCR-आवश्यक अन्य अवयवहरू छन्।मास्टर मिक्स 3 महिनाको लागि 4℃ मा हाम्रो अनुकूलित स्थिरता संग स्थिर छ।पूर्व-मिक्स समाधान पारंपरिक PCR को लागि अनुकूलित छ र DNA टेम्प्लेट र प्राइमरहरू थपेर प्रयोग गर्न तयार छ।PCR उत्पादनहरू इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि प्रि-लोड गरिएको ब्रोमोफेनोल निलो डाईको साथ सीधा लोड गर्न सकिन्छ।एम्प्लीफाइड उत्पादनहरूमा 3 '-dA प्रोट्रुजन हुन्छ र सजिलै T भेक्टरमा क्लोन गर्न सकिन्छ।2×PCR मास्टर मिक्सले PCR प्रक्रियालाई सरल बनाउँछ र प्रदूषण कम गर्छ।
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादनहरू -25 ℃ ~ -15 ℃ मा 2 वर्षको लागि भण्डारण गर्नुपर्छ।
निर्दिष्टीकरणहरू
निष्ठा ( बनाम Taq ) | १× |
हट स्टार्ट | No |
ओभरह्याङ | ३'-ए |
पोलिमरेज | Taq DNA पोलिमरेज |
प्रतिक्रिया ढाँचा | सुपरमिक्स वा मास्टर मिक्स |
प्रतिक्रिया गति | मानक |
उत्पादन प्रकार | PCR मास्टर मिक्स (2x) |
निर्देशनहरू
१.प्रतिक्रिया प्रणाली
अवयवहरू | भोल्युम(μL) |
टेम्प्लेट डीएनए | उपयुक्त |
प्राइमर १ (१० μmol/L) | 2 |
प्राइमर २ (१० μmol/L) | 2 |
2× पीसीआर मास्टर मिक्स | 25 |
ddH2O | 50 सम्म |
2.प्रवर्धन प्रोटोकल
साइकल चरणहरू | तापक्रम (°C) | समय | साइकलहरू |
प्रारम्भिक विकृतीकरण | 94 | ५ मिनेट | 1 |
विकृतीकरण | 94 | ३० सेकेन्ड | 35 |
एनिलिङ | ५०-६० | ३० सेकेन्ड | |
विस्तार | 72 | 30-60 सेकेन्ड/kb | |
अन्तिम विस्तार | 72 | १० मिनेट | 1 |
नोट:
1) टेम्प्लेट उपयोग: 50-200ng जीनोमिक डीएनए;0.1-10ng प्लाज्मिड DNA।
२) एमजी2+एकाग्रता: यो उत्पादनले MgCl2 को 3mM समावेश गर्दछ, धेरै PCR प्रतिक्रियाहरूको लागि उपयुक्त।
3) एनीलिंग तापमान: कृपया प्राइमरहरूको सैद्धान्तिक Tm मानलाई सन्दर्भ गर्नुहोस्।प्राइमरको सैद्धान्तिक मूल्य भन्दा कम 2-5 ℃ मा annealing तापमान सेट गर्न सकिन्छ।
4) विस्तार समय: आणविक पहिचान को लागी, 30 सेकेन्ड / kb सिफारिस गरिएको छ।जीन क्लोनिङको लागि, 60 सेकेन्ड/केबी सिफारिस गरिएको छ।
नोटहरू
१.2× PCR मास्टर मिक्स भएका PCR उत्पादनहरू polyacrylamide जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि उपयुक्त छैनन्।
२.तपाईंको सुरक्षा र स्वास्थ्यको लागि, कृपया प्रयोगशाला कोट र सञ्चालनको लागि डिस्पोजेबल पन्जा लगाउनुहोस्।
३.यो अनुसन्धान प्रयोगको लागि मात्र प्रयोग गरिन्छ!