RT-LAMP कलरमेट्रिक मास्टर मिक्स HCB5204A
यो उत्पादनमा प्रतिक्रिया बफर, RT-Enzymes मिक्स (Bst DNA पोलिमरेज र गर्मी-प्रतिरोधी रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज), lyophilized प्रोटेक्टेन्ट र क्रोमोजेनिक डाई कम्पोनेन्टहरू छन्।प्रयोग गर्न, केवल बफर प्रयोग गर्नुहोस्, प्रतिक्रिया इन्जाइम र प्राइमर मिश्रित छन् र टेम्प्लेटमा थपिएका छन्;lyophilized संरक्षक थप्दै सीधा हुन सक्छ।यो एक lyophilizer मा जडान गरिएको थियो र lyophilized, र प्रयोग गर्दा प्राइमर र टेम्प्लेटहरू मात्र थपिएको थियो।यो किटले प्रवर्धनको द्रुत, स्पष्ट दृश्य पहिचान प्रदान गर्दछ, जुन नकारात्मक प्रतिक्रिया रातो र सकारात्मक प्रतिक्रिया पहेंलोमा परिवर्तन द्वारा संकेत गरिएको छ।
कम्पोनेन्ट
| कम्पोनेन्ट | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रङ्ग संग) | ०.९६ एमएल | ४.८० एमएल × २ | ९.६० एमएल × १० |
| RT-Enzymes मिक्स | 270 μL | २.७० एमएल | २.७० एमएल × १० |
| Lyophilized संरक्षक | ०.९६ एमएल × २ | ९.६० एमएल × २ | ९.६० एमएल × २० |
अनुप्रयोगहरू
डीएनए वा आरएनए आइसोथर्मल प्रवर्धनको लागि।
भण्डारण सर्तहरू
सुख्खा बरफ संग ढुवानी, -25 ~ -15 ℃ मा भण्डारण।बारम्बार फ्रिज-थउबाट बच्नुहोस्, उत्पादन 12 महिनाको लागि मान्य छ।
प्रोटोकल
1.कोठाको तापक्रममा प्रयोग गरिने प्रतिक्रिया बफरलाई पगाल्नुहोस्।राम्रोसँग मिलाउनको लागि धेरै पटक भर्टेक्स वा ट्यूबहरू उल्टो गर्नुहोस्, त्यसपछि तरललाई ट्यूबको फेदमा जम्मा गर्न सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्।
2.प्रतिक्रिया प्रणाली को तयारी।यो अभिकर्मक दुई प्रतिक्रिया प्रणाली, तरल प्रतिक्रिया मिश्रण र lyophilized प्रणाली मिश्रण मा तयार गर्न सकिन्छ।
1) तरल प्रतिक्रिया मिश्रण तयार गर्नुहोस्
| कम्पोनेन्ट | भोल्युम |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रङ्ग संग) | १० μL |
| RT-Enzymes मिक्स | 2.8 μL |
| १० × प्राइमर मिक्सa | ५ μL |
| टेम्प्लेट DNA/RNA b | × μL |
| न्यूक्लिज-मुक्त पानी | 50 μL सम्म |
2) Lyophilization प्रणाली मिश्रण
① लियोफिलाइज्ड मिश्रण तयार गर्नुहोस्
| कम्पोनेन्ट | भोल्युम |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रङ्ग संग) | १० μL |
| Lyophilized संरक्षक | 20 μL |
| RT-Enzymes मिक्स | 2.8 μL |
| न्यूक्लिज-मुक्त पानी | 50 μL सम्म |
② Lyophilization: तयार मिक्स एक 50μL प्रणाली मा lyophilized थियो
③ प्रतिक्रिया मिश्रण तयार गर्नुहोस्
| कम्पोनेन्ट | भोल्युम |
| Lyophilized मिश्रण | १ टुक्रा |
| १० × प्राइमर मिक्सa | ५ μL |
| टेम्प्लेट DNA/RNA b | × μL |
| न्यूक्लिज-मुक्त पानी | 50 μL सम्म |
नोट:
१) क.10×प्राइमर मिक्स : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM लूप F/B;
२) ख।DEPC (पानीमा घुलनशील) न्यूक्लिक एसिड टेम्पलको लागि सिफारिस गरिन्छ।
1.30-45 मिनेटको लागि 65 डिग्री सेल्सियसमा इन्क्यूबेट गर्नुहोस्, जुन रङ परिवर्तन प्रतिक्रिया समय अनुसार उचित रूपमा विस्तार गर्न सकिन्छ।
2.नाङ्गो आँखा अनुसार, पहेंलो सकारात्मक थियो र रातो नकारात्मक थियो।
नोटहरू
1.नुन बफर ट्यूबको फेदमा देखा पर्न सक्छ, कोठाको तापक्रममा राम्ररी मिलाउनको लागि छोटकरीमा भर्टेक्स वा ट्यूबहरू धेरै पटक उल्ट्याउन सक्छ।
2.प्रतिक्रिया तापमान प्राइमर को अवस्था अनुसार 62 ℃ र 68 ℃ बीच अनुकूलित गर्न सकिन्छ।
3.प्याकेज गरिएका अभिकर्मकहरू लामो समयसम्म हावामा पर्नु हुँदैन।
4.रातो र पहेँलो विकृति प्रतिक्रिया प्रतिक्रिया प्रणालीको pH परिवर्तनमा निर्भर गर्दछ, कृपया ddH प्रयोग गर्न सिफारिस गरिएको Tris न्यूक्लिक एसिड भण्डारण समाधान प्रयोग नगर्नुहोस्।2O भण्डारण गरिएको न्यूक्लिक एसिड;
5.प्रयोग मानकीकृत हुनुपर्छ, प्रतिक्रिया प्रणाली को तयारी सहित, lyophilization, र नमूना प्रशोधन र नमूना थप्ने प्रक्रिया;
6.दूषित हुनबाट बच्नको लागि, प्रतिक्रिया प्रणालीलाई अल्ट्रा-क्लिन बेन्चमा तयार गर्न सिफारिस गरिन्छ, अन्यमा झूटा सकारात्मक हस्तक्षेपबाट बच्न कोठाको फ्युम हुडमा टेम्प्लेटहरू थप्नुहोस्।
