5×नियोस्क्रिप्ट फास्ट RT-qPCR प्रिमिक्स प्लस-UNG

बिरालो नम्बर: HCB5142A

Neoscript Fast RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) एक-चरण रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन र मात्रात्मक PCR (qRT-PCR) को लागि उपयुक्त एक उच्च स्थिर एक-ट्यूब प्रोब-आधारित मिश्रण हो।यसले प्राइमर र प्रोबहरूको पूर्व-मिश्रणलाई समर्थन गर्दछ र कम तापक्रममा लामो समय भण्डारण पछि स्थिर रहन्छ।परीक्षण गरिने नमूना सिधै थप्न सकिन्छ प्रयोग गर्दा, अतिरिक्त ट्यूब खोल्ने/पाइपेटिङ सञ्चालन बिना।यो उत्पादनले कम्पोनेन्टहरू प्रदान गर्दछ, जस्तै हट-स्टार्ट DNA पोलिमरेज, M-MLV, गर्मी-लेबिल यूरासिल DNA ग्लाइकोसिलेज (TS-UNG), RNase अवरोधक, MgCl₂, dNTPs (dTTP को सट्टा dUTP संग), र स्टेबिलाइजरहरू।आनुवंशिक रूपमा परिमार्जित द्रुत एम्प्लीफिकेशन रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज र डीएनए पोलिमरेजको साथ, २०-४० मिनेट भित्र पीसीआर प्रवर्धन पूरा गर्न सम्भव छ।यो अभिकर्मकले qPCR को लागि एन्टि-इनहिबिटरी एम्प्लीफिकेशन इन्जाइम र UNG इन्जाइमको मिश्रित इन्जाइमहरू सहित विशेष बफर प्रयोग गर्दछ।तसर्थ, यसले लक्ष्य जीनको राम्रो प्रवर्धन प्राप्त गर्न सक्छ र PCR अवशिष्ट र एरोसोल प्रदूषणको कारणले गलत प्रवर्धनलाई रोक्न सक्छ।यो अभिकर्मक एप्लाइड बायोसिस्टम्स, एपेन्डोर्फ, बायो-राड र रोचे जस्ता निर्माताहरूबाट प्रायः फ्लोरोसेन्स मात्रात्मक पीसीआर उपकरणहरूसँग उपयुक्त छ।

कम्पोनेन्ट

१.25×नियोस्क्रिप्ट फास्ट RTase/UNG मिक्स

२.५×नियोस्क्रिप्ट फास्ट आरटी प्रिमिक्स बफर (dUTP)

भण्डारण सर्तहरू

सबै कम्पोनेन्टहरू लामो अवधिको भण्डारणको लागि -20 ℃ मा र 3 महिना सम्म 4 ℃ मा राख्नुपर्छ।कृपया पग्लिएपछि राम्ररी मिलाउनुहोस् र प्रयोग गर्नु अघि सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्।बारम्बार फ्रिज-थवबाट बच्नुहोस्।

qRT-PCR प्रतिक्रिया प्रणाली तयारी

1) a. प्राइमरको अन्तिम एकाग्रता सामान्यतया 0.2μM हुन्छ।राम्रो परिणामहरूको लागि, प्राइमर एकाग्रता 0.2-1μM को दायरा भित्र अनुकूलित गर्न सकिन्छ।सामान्यतया, प्रोब एकाग्रता 0.1-0.3μM को दायरा भित्र अनुकूलित गर्न सकिन्छ।

2) b. छिटो PCR प्रक्रिया प्रयोग गर्दा, प्राइमर र प्रोबहरूको एकाग्रता बढाउँदा राम्रो प्रवर्द्धन परिणामहरू हुन सक्छ, र तिनीहरूको अनुपात तदनुसार अनुकूलित हुनुपर्छ।

3) विभिन्न प्रकारका नमूनाहरूमा विभिन्न प्रकार र अवरोधकको सामग्री र लक्षित जीनको प्रतिलिपि संख्या समावेश हुन्छ।नमूना मात्रा वास्तविक अवस्था द्वारा विचार गर्नुपर्छ।यदि आवश्यक भएमा, न्यूक्लिज-मुक्त पानी वा TE बफरको साथ नमूनाको पतला बनाउनुहोस्।

प्रतिक्रिया Cशर्तहरू

गुणस्तर नियन्त्रण

1।प्रकार्य पत्ता लगाउने: qPCR को संवेदनशीलता, विशिष्टता र दोहोर्याउने क्षमता।

२.एक्सोजेनस न्यूक्लिज गतिविधि छैन: एक्सोजेनस एन्डोन्यूक्लिज र एक्सोन्यूक्लिज प्रदूषण छैन।

नोटहरू

१.द्रुत DNA पोलिमरेजको प्रवर्धन दर 1kb/10s भन्दा कम छैन।विभिन्न PCR उपकरणहरूमा फरक ताप र शीतलन गति, तापक्रम नियन्त्रण मोडहरू र थर्मल चालकता हुन्छ, र यसरी तपाईंको विशेष द्रुत PCR उपकरणको संयोजनमा तपाईंको प्राइमर/प्रोब एकाग्रता र चल्ने विधिको अनुकूलन आवश्यक छ।

२.यो उत्पादन व्यापक प्रयोज्यता प्रदर्शन गर्दछ, र यो उच्च संवेदनशीलता आणविक निदान लागि उपयुक्त छ।कम एनिलिङ तापक्रम भएका प्राइमरहरूका लागि वा २०० बीपीभन्दा लामो टुक्राहरूको प्रवर्धनका लागि तीन-चरण PCR विधि सिफारिस गरिन्छ।

३.विभिन्न एम्प्लिकनहरूमा dUTP को फरक उपयोगिता दक्षता र UNG को लागि फरक संवेदनशीलता भएको हुनाले, UNG प्रणाली प्रयोग गर्दा पत्ता लगाउने संवेदनशीलता कम भएमा अभिकर्मकहरूलाई अनुकूलित गरिनु पर्छ।आवश्यक भएमा प्राविधिक सहयोगको लागि कृपया हामीलाई सम्पर्क गर्नुहोस्।

४।क्यारीओभर PCR उत्पादनहरूको प्रवर्द्धनबाट बच्न, एम्प्लीफिकेशनको लागि समर्पित प्रयोगात्मक क्षेत्र र पिपेट आवश्यक छ।पञ्जा लगाएर चलाउनुहोस् र बारम्बार परिवर्तन गर्नुहोस् र प्रवर्द्धन पछि PCR ट्यूब नखोल्नुहोस्।