Peroxidase (Horseradish स्रोत) पर्यायवाची: हाइड्रोजन पेरोक्साइड oxidoreductase;HRP
विवरण
Horseradish peroxidase (HRP) को हर्सराडिश (Amoracia rusticana) को जराबाट अलग गरिएको छ र peroxidases को ferroprotoporphyrin समूहसँग सम्बन्धित छ।HRP सजिलै हाइड्रोजन पेरोक्साइड (H2O2) सँग मिल्छ।परिणामस्वरूप [HRP-H2O2] जटिलले हाइड्रोजन दाताहरूको एक विस्तृत विविधतालाई अक्सिडाइज गर्न सक्छ:
डोनर + H2O2 → अक्सिडाइज्ड डोनर + 2 H2O
HRP ले विभिन्न सब्सट्रेटहरूलाई अक्सिडाइज गर्नेछ (तालिका १ हेर्नुहोस्):
• क्रोमोजेनिक
• Chemiluminescent (जस्तै luminol वा isoluminol)
• फ्लोरोजेनिक (जस्तै tyramine, homovanillic एसिड, वा 4-hydroxyphenyl एसिटिक एसिड)
HRP एकल चेन पोलिपेप्टाइड हो जसमा चारवटा डाइसल्फाइड ब्रिजहरू हुन्छन्।HRP एक ग्लाइकोप्रोटिन हो जसमा 18% कार्बोहाइड्रेट हुन्छ।कार्बोहाइड्रेट संरचनामा ग्यालेक्टोज, अरबिनोज, जाइलोज, फ्युकोज, म्याननोज, म्यानोसामाइन र ग्यालेक्टोसामाइन हुन्छ, विशिष्ट आइसोजाइमको आधारमा।
HRP इम्युनोब्लोटिंग, इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री, र ELISA लगायत विभिन्न इम्युनोकेमिस्ट्री अनुप्रयोगहरूमा इम्युनोग्लोबुलिनहरूको लागि व्यापक रूपमा प्रयोग गरिएको लेबल हो।एचआरपीलाई ग्लुटाराल्डिहाइड, पिरियडेट अक्सिडेशन, डाइसल्फाइड बन्डहरू मार्फत, र एमिनो र थिओल निर्देशित क्रस-लिङ्करहरू मार्फत पनि विभिन्न विधिहरूद्वारा एन्टिबडीहरूमा संयुग्मित गर्न सकिन्छ।एचआरपी एन्टिबडीहरूको लागि सबैभन्दा वांछित लेबल हो, किनकि यो तीन सबैभन्दा लोकप्रिय इन्जाइम लेबलहरू (पेरोक्सिडेज, β-गैलेक्टोसिडेस, अल्कालाइन फास्फेट) मध्ये सबैभन्दा सानो र सबैभन्दा स्थिर हो र यसको ग्लाइकोसिलेशनले कम गैर-विशिष्ट बन्धनमा नेतृत्व गर्दछ।Glutaraldehyde र periodate conjugation विधिहरूको समीक्षा प्रकाशित गरिएको छ।
पेरोक्सिडेज पनि ग्लुकोज 4 र समाधान मा पेरोक्साइड को निर्धारण को लागी प्रयोग गरिन्छ।धेरै प्रकाशनहरू, 6-24 शोधपत्रहरू, 25-29 र शोध प्रबंधहरू 30-46 ले तिनीहरूको अनुसन्धान प्रोटोकलहरूमा P8375 को प्रयोगलाई उद्धृत गरेको छ।
रासायनिक संरचना
निर्दिष्टीकरण
परीक्षण वस्तुहरू | निर्दिष्टीकरणहरू |
विवरण | रातो-खैरो अनाकार पाउडर, lyophilized |
गतिविधि | ≥100U/mg |
शुद्धता (SDS-PAGE) | ≥९०% |
घुलनशीलता (10 मिलीग्राम पाउडर / एमएल) | खाली गर्नुहोस् |
इन्जाइमहरू दूषित | |
NADH/NADPH oxidase | ≤0.1% |
Catalase | ≤0.005% |
ATPase | ≤ ०.०३% |
ढुवानी र भण्डारण
यातायात:2-8 डिग्री सेल्सियस अन्तर्गत पठाइयो
भण्डारण:-20 डिग्री सेल्सियस (लामो अवधि), 2-8 डिग्री सेल्सियस (छोटो अवधि) मा भण्डार गर्नुहोस्
पुन: परीक्षण सिफारिस गरियोजीवन:२ वर्ष