वन स्टेप फास्ट RT-qPCR Probe Premix-UNG
बिरालो नम्बर: HCR5143A
वन स्टेप RT-qPCR प्रोब किट (फास्टको लागि) एकल-प्लेक्स वा मल्टिप्लेक्स मात्रात्मक PCR को लागि उपयुक्त एक प्रोब-आधारित RT-qPCR द्रुत पत्ता लगाउने किट हो जुन RNA लाई टेम्प्लेट (जस्तै RNA भाइरस) को रूपमा प्रयोग गर्दछ।यस उत्पादनले एन्टिबडी-परिमार्जित Taq DNA पोलिमरेज र एक-चरण समर्पित रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेजको नयाँ पुस्ताको प्रयोग गर्दछ, द्रुत प्रवर्धनको लागि एक अनुकूलित बफरको साथ, जसमा द्रुत प्रवर्धन गति, उच्च प्रवर्धन दक्षता र विशिष्टता छ।यसले छोटो समयमा कम र उच्च एकाग्रता नमूनाहरूको सिंगल-प्लेक्स र मल्टिप्लेक्समा सन्तुलित प्रवर्धन समर्थन गर्दछ।
अवयवहरू
1. 5×RT-qPCR बफर (U+)
२. इन्जाइम मिक्स (U+)
नोट:
a5×RT-qPCR बफर (U+) मा dNTP र Mg समावेश छ2+;
bइन्जाइम मिक्स (U+) मा रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज, हट स्टार्ट Taq DNA पोलिमरेज, RNase अवरोधक र UDG समावेश छ;
गRNase-मुक्त सुझावहरू, EP ट्यूबहरू, आदि प्रयोग गर्नुहोस्।
प्रयोग गर्नु अघि, 5×RT-qPCR बफर (U+) लाई राम्ररी मिलाउनुहोस्।यदि पग्लिसकेपछि कुनै वर्षा भयो भने, बफरलाई कोठाको तापक्रममा फर्काउनको लागि पर्खनुहोस्, मिश्रण गर्नुहोस् र विघटन गर्नुहोस्, र त्यसपछि तिनीहरूलाई सामान्य रूपमा प्रयोग गर्नुहोस्।
भण्डारण सर्तहरू
उत्पादन सुक्खा बरफ संग पठाइन्छ र 1 वर्ष को लागि -25~-15℃ मा भण्डारण गर्न सकिन्छ।
निर्देशनहरू
1. प्रतिक्रिया प्रणाली
| अवयवहरू | भोल्युम (२० μL प्रतिक्रिया) |
| 2 ×RT-qPCR बफर | 4μL |
| इन्जाइम मिक्स (U+) | ०.८μL |
| प्राइमर फर्वार्ड | 0.1~ 1.0μM |
| प्राइमर उल्टो | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan अनुसन्धान | ०.०५~०.२५μM |
| टेम्प्लेट | X μL |
| RNase-मुक्त पानी | 25μL सम्म |
नोट: प्रतिक्रिया मात्रा 10-50μL छ।
२. साइकल चलाउने प्रोटोकल (एसtandard)
| साइकल कदम | अस्थायी। | समय | साइकलहरू |
| उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन | ५५ ℃ | १० मिनेट | 1 |
| प्रारम्भिक विच्छेदन | 95 ℃ | ३० सेकेन्ड | 1 |
| विकृतीकरण | 95 ℃ | १० सेकेन्ड | 45 |
| एनिलिङ/विस्तार | ६० ℃ | ३० सेकेन्ड |
| साइकल प्रोटोकल (छिटो) साइकल कदम |
अस्थायी। |
समय |
साइकलहरू |
| उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन | ५५ ℃ | ५ मिनेट | 1 |
| प्रारम्भिक विच्छेदन | 95 ℃ | ५ सेकेन्ड | 1 |
| विकृतीकरण | 95 ℃ | ३ सेकेन्ड | 43 |
| एनिलिङ/विस्तार | ६० ℃ | १० सेकेन्ड |
नोट:
aउल्टो ट्रान्सक्रिप्शन तापमान 50 ℃ देखि 60 ℃ को बीच छ, तापक्रम वृद्धिले जटिल संरचना र उच्च CG सामग्री टेम्प्लेटहरू विस्तार गर्न मद्दत गर्दछ;
bइष्टतम एनिलिङ तापक्रमलाई प्राइमरको Tm मानको आधारमा समायोजन गर्न आवश्यक छ, र वास्तविक समय PCR उपकरणमा आधारित फ्लोरोसेन्स सङ्केत सङ्कलनका लागि सबैभन्दा छोटो समय चयन गर्नुहोस्।
नोटहरू
कृपया आफ्नो स्वास्थ्य र सुरक्षा सुनिश्चित गर्न आवश्यक PPE, जस्तै प्रयोगशाला कोट र पन्जा लगाउनुहोस्!
