CHO HCP एलिसा किट

यस परखमा एक-चरण इम्युनोसर्बेन्ट एलिसा विधि प्रयोग गरिन्छ।CHOK1 HCP भएका नमूनाहरूले HRP-लेबल गरिएको बाख्रा एन्टि-CHOK1 एन्टिबडी र एलिसा प्लेटमा लेपित एन्टि-CHOK1 एन्टिबडीसँग एकैसाथ प्रतिक्रिया गर्छ, अन्ततः ठोस-फेज एन्टिबडी-HCP-लेबल गरिएको एन्टिबडीको स्यान्डविच कम्प्लेक्स बनाउँछ।अनबाउन्ड एन्टिजेन-एन्टिबडी एलिसा प्लेट धोएर हटाउन सकिन्छ।TMB सब्सट्रेट पर्याप्त प्रतिक्रियाको लागि इनारमा थपिएको छ।स्टप समाधान थपेपछि रङको विकास रोकिन्छ, र 450/650nm मा प्रतिक्रिया समाधानको OD वा अवशोषण मान माइक्रोप्लेट रिडरसँग पढिन्छ।OD मान वा अवशोषण मान समाधानमा रहेको HCP सामग्रीसँग समानुपातिक हुन्छ।यसबाट, समाधानमा HCP एकाग्रता मानक वक्र अनुसार गणना गर्न सकिन्छ।

आवेदन

यो किट नमूनाहरूमा CHOK1 होस्ट सेल प्रोटीन अवशेषहरूको सामग्री मात्रात्मक रूपमा पत्ता लगाउन प्रयोग गरिन्छ।

Cघटकहरू

उपकरण आवश्यक छ

भण्डारण र स्थिरता

1.-25~-15°C मा यातायात।

2.भण्डारण अवस्थाहरू तालिका 1 मा देखाइएका छन्;कम्पोनेन्टहरू 1-2 भण्डारण गरिएका छन् ≤–20°C, 5-6 भण्डारण गरिएका छन् RT,3、4, 7, 8 2-8 ℃ मा भण्डारण गरिन्छ;वैधता अवधि 12 महिना हो।

उत्पादन मापदण्डहरू

1।संवेदनशीलता: 1ng/mL

२.पत्ता लगाउने दायरा: 3- 100ng/mL

३.सटीक: अन्तर-पख CV≤ 10%, अन्तर-परीक्षण CV≤ 15%

४।HCP कवरेज: >80%

५।विशिष्टता: यो किट सार्वभौमिक छ किनकि यसले विशेष रूपमा शुद्धिकरण प्रक्रियाबाट स्वतन्त्र CHOK1 HCP सँग प्रतिक्रिया गर्दछ।

अभिकर्मक तयारी

१.PBST ०.०५%

ddH मा पातलो 20×PBST 0.05% को 15 ml लिनुहोस्₂O, र 300 ml सम्म बनेको छ।

२.1.0% BSA

बोतलबाट 1 ग्राम BSA लिनुहोस् र PBST 0.05% को 100 मिलीलीटरमा पातलो पार्नुहोस्, पूर्ण रूपमा विघटन नभएसम्म राम्ररी मिलाउनुहोस्, र 2-8 डिग्री सेल्सियसमा भण्डार गर्नुहोस्।तयार पारिएको बफर 7 दिनको लागि मान्य छ।यो आवश्यक रूपमा तयार गर्न सिफारिस गरिएको छ।

३.पत्ता लगाउने समाधान 2μg/mL

0.5 mg/mL Anti-CHO HCP-HRP को 48μL लिनुहोस् र 2μg/mL पत्ता लगाउने समाधानको अन्तिम एकाग्रता प्राप्त गर्न 1% BSA को 11,952μL मा पातलो गर्नुहोस्।

४।QC र CHOK1 HCP मानकहरूको तयारी

तालिका: QC र मानकहरूको तयारी 

परख प्रक्रिया

१.माथिको "Reagent Preparation" मा उल्लेख गरिए अनुसार अभिकर्मकहरू तयार गर्नुहोस्।

२.प्रत्येक इनारमा 50μL मापदण्ड, नमूनाहरू र QC हरू लिनुहोस् (तालिका 3 हेर्नुहोस्), त्यसपछि 100μL पत्ता लगाउने समाधान (2μg/mL) थप्नुहोस्;प्लेटलाई सीलरले छोप्नुहोस्, र ELISA प्लेटलाई थर्मोमिक्सरमा राख्नुहोस्।500rpm, 25±3℃ मा 2 घण्टाको लागि इन्क्युबेट गर्नुहोस्।

३.सिङ्कमा माइक्रोप्लेट उल्टाउनुहोस् र कोटिंग समाधान खारेज गर्नुहोस्।PBST 0.05% को पिपेट 300μL प्रत्येक इनारमा ELISA प्लेट धुनुहोस् र समाधान खारेज गर्नुहोस्, र धुलाई 3 पटक दोहोर्याउनुहोस्।प्लेटलाई सफा पेपर तौलियामा उल्टाउनुहोस् र सुख्खा गर्नुहोस्।

४।प्रत्येक इनारमा TMB सब्सट्रेटको 100μL (तालिका १ हेर्नुहोस्) थप्नुहोस्, ELISA प्लेटलाई सिल गर्नुहोस्, र 25±3 ℃ मा 15 मिनेटको लागि अँध्यारोमा इन्क्युबेट गर्नुहोस्।

५।प्रत्येक इनारमा 100μL स्टप समाधानको पिपेट।

६।माइक्रोप्लेट रिडरको साथ 450/650nm को तरंग लम्बाइमा अवशोषण मापन गर्नुहोस्।

७।SoftMax वा समकक्ष सफ्टवेयर द्वारा डाटा विश्लेषण गर्नुहोस्।चार-प्यारामिटर लजिस्टिक रिग्रेसन मोडेल प्रयोग गरेर मानक वक्र प्लट गर्नुहोस्।

मानक वक्र उदाहरण

नोट: यदि नमूनामा HCP को एकाग्रता मानक कर्भको माथिल्लो सीमा भन्दा बढी छ भने, परीक्षण गर्नु अघि यसलाई राम्रोसँग पातलो बफरसँग पातलो गर्न आवश्यक छ।

नोटहरू

स्टप समाधान 2M सल्फ्यूरिक एसिड हो, कृपया स्प्ल्याशिंगबाट बच्न सावधानीपूर्वक ह्यान्डल गर्नुहोस्!